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點(diǎn)擊次數:157 發(fā)布時(shí)間:2023/2/9 10:42:14
2',7'-二氯熒光素二乙酸酯 天津本生
中文名稱(chēng):2',7'-二氯熒光素二乙酸酯
英文名稱(chēng):2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate
別名: DCFH-DA
CAS No:4091-99-0 分子式:C24H16Cl2O7 分子量:487.29
MDL:MFCD00128955
規格:25mg/50mg/100mg/1g
外觀(guān)與性狀:白色粉末
溶解性:溶于DMSO (25 mg/ml)
保存條件:-20℃ 避光 干燥
包裝:25mg 50mg 100mg 500mg 1g in glass bottle
產(chǎn)品描述:
2',7'-二氯熒光素二乙酸酯 天津本生 產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
一種細胞可滲透的非熒光探針。在細胞內脫酯化的并可經(jīng)氧化轉化為具有強熒光的2′,7′-二氯熒光素。
應用包括響應氧化代謝的活性氧的靈敏快速定量;用于吞噬細胞中的氧化產(chǎn)物的微孔板檢測;以及定量多孔髓樣分化測定。
細胞染色方案(僅供參考):
1.制備1-10mM DMSO儲備溶液。 應將未使用的DMSO儲備溶液等分到單次使用的小瓶中并儲存在-20℃,避光。
2.在生理緩沖液(如PBS,HBSS,HEPES)中使染料的工作濃度為1-10μM。根據經(jīng)驗確定佳工作濃度。
3.從生長(cháng)培養基中取出細胞,將染料工作溶液(來(lái)自步驟2)加入細胞中,并在室溫或37℃下孵育細胞5至60分鐘。
4.去除染料工作溶液; 用預熱的HBSS洗滌,加入預熱的HBSS或生長(cháng)培養基,在佳溫度下孵育。 佳孵育時(shí)間可能相差較大,因為一些細胞類(lèi)型通常表現出低水平的酯酶活性。
5.在將細胞暴露于實(shí)驗誘導物之,確定加載細胞樣品的基線(xiàn)熒光強度。
6.陰性對照應評估如下:
A:檢查未染色的細胞在綠色發(fā)射范圍內的自發(fā)熒光。
B:對于流式細胞術(shù),確定染料加載和處理后細胞的正向和側向散射不變。細胞尺寸的變化可能與處理或毒性反應引起的起泡或收縮有關(guān)。
C:檢測有沒(méi)有誘導物的染料和緩沖液/培養基的無(wú)細胞混合物的熒光。在沒(méi)有細胞外酯酶和其他氧化酶的情況下,熒光隨時(shí)間的逐漸增加可能與自發(fā)水解,大氣氧化或光誘導有關(guān)。
D:檢查已經(jīng)保存在生長(cháng)培養基或簡(jiǎn)單緩沖液中的未處理(對照)負載細胞的熒光。在染料加載孵育后,健康細胞應表現出低水平的熒光,在實(shí)驗期間相對穩定; 然而,可以觀(guān)察到熒光逐漸增加(由于自動(dòng)氧化)或減少(由于細胞中的染料損失或光漂白)。 在沒(méi)有任何刺激或誘導的情況下,健康的未經(jīng)處理的細胞中的熒光突發(fā)可以指示細胞死亡或一些其他氧化事件的進(jìn)展。
7.可以用H2O2或叔丁基過(guò)氧化氫(TBHP)刺激陽(yáng)性對照至終濃度~100μM(基于細胞的敏感性和反應增加或減少劑量)。
2',7'-二氯熒光素二乙酸酯 本生生物公司供應:ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過(guò)濾器等。
更新時(shí)間:2024/11/29 8:39:47
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